抗寒月季的组培快繁技术

月季是蔷薇属的木本花卉,有“花中皇后”的美誉,深受人们的喜欢.为我国十台甫花之一,在我国有30多个城市将其选为市花。抗寒月季是近几年选育出来的能够适应北方严寒天气特点的新的月季品种,以其花大,色艳、花期长被北方园林绿化彩化中普遍应用，但由于其繁殖以扦插繁殖为主，繁殖速度慢，满足不了生发生长的需要，而组织培育可在短期内得到大量的优良种苗，为此，我们于2003~2021年开展了抗寒月季组培快繁的研究工作。1材料与方式1.1材料 试验所用的材料为长春市园林科学研究所抗寒月季基地抗寒月季新品种。1.2方式1．2．1外植体的准备 取生长结实优良母株上带有腋芽的嫩茎，摘除叶片和嫩刺，用自来水冲洗清洁后，用浸有75%的酒精棉球擦拭外面5~10S，剪成3~5cm左右的茎段，在超净工作台上，用0.1%升汞溶液消毒10~12分，无菌水冲洗3~5次，再用无菌滤纸吸干外面水分，切成带有1个或2个腋芽的茎段接种到培育基中。1．2．2腋芽的分化与增殖 把外植体划分接种于添加6-BA和NAA的MS培育基上举行起始培育，诱导腋芽萌发成立无菌快速繁殖无性系，再将无菌小苗剪切成1~2cm左右的小段接种到添加不同6-BA和NAA的MS培育基中举行继代增殖培育，培育一准时间后对小苗的增殖与生长情况举行观测统计分解，培育基含30g/l糖、8g/l琼脂、pH值5.8~6.5、培育温度(25+-3)，每天光照为11~12小时，光照强度1000~1500LX。1．2．3生根与移栽 将增殖后长势兴旺、节间绅长适度的无根小苗转接到1/2MS培育基中诱导生根，30天后观测生根情况。 生根后的试管苗在常温下炼苗5~7天，移栽到草碳+珍珠岩(体积比为1∶1)的基质中，待成活后小苗高达10cm左右移到田间栽植。2效果与讨论2．1腋芽分化 将外植体接种到MS+2.0mg/l6-BA+0.1mg/lNAA的培育基上培育7天后，大部格外植体开始萌动，10天腋芽膨大显著，随后长出嫩芽形成无根芽从。 为选择出不同质量浓度6-BA对诱导腋芽分化的影响，以MS为基本培育基配制7种附加不同质量浓度(划分为0.10.51.01.52.03.04.0)的6-BA与0.1mg/lNAA配组的腋芽诱导培育基,每组培育基接种40个外植体,培育40天观测其腋芽分化情况(见表1)。 表1解释,月季腋芽分化率与培育基中6-BA质量浓度呈抛物线关系,6-BA由0.1增添至3.0时腋芽分化率显著提高,以3.0为较高,腋芽分化率达77.5%;当6-BA的质量继续增添时,其腋芽分化率则显著下降;6-BA质量浓度为0.1时其腋芽分化率较低,仅为7.5%;6-BA质量浓度为5.0时,其腋芽分化率只为15%,可见,培育基中6-BA质量浓度为1.5~3.0时有利于诱导腋芽分化,尤其以2.0~3.0时为较佳。2.2继代增殖培育 取自统一种培育基上长势、大小平等的继代培育芽和茎段，同时接种到不同质量浓度的6-BA、NAA的MS培育基中，培育30天后举行观测并统计效果(见表2)。 由表2可以看出，在NAA质量浓度相同而6-BA质量浓度不同的处理中，随着6-BA浓度的升高(1.5~3.0)芽苗的增殖倍数也相应提高，NAA为0.05~0.1、6-BA为3.0的处理芽苗增殖倍数高达6.6~6.8倍；可见，培育基中6-BA质量浓度为3.0、NAA质量浓度为0.05时为较佳的诱导腋芽分化的处理组合。2．3生根培育 无菌芽苗在分化与增殖培育基中只诱导地上部门，既不停地分枝增殖，曾多次出现现蕾、开花现象，但均不易生根。因此，将原来培育基中的大量元素减半(既1/2MS)，并去除BA举行根的诱导。效果在无菌苗根的诱导历程中，生长素的种类和使用浓度起决议性作用，为此对不同种类的生长素NAA、IBA、A、IAA的根效应作对比试验，效果解释，NAA、IBA匹敌寒月季无菌苗诱根效应显著优于IAA，但两者之间不同不显著，用IAA举行根的诱导，芽苗基部长出较多的愈伤组织，发根率低，且发根量少，移栽成活率下降，这可能是由于生长过多的愈伤组织影响根系维牵制的发育所致，为为了解NAA和IBA的适宜质量浓度，举行了NAA和IBA的质量浓度试验，划分设置0.1、0.2、0.3、0.5、0.75、1.0、1.5等7种质量浓度举行比较，培育30天后观测根系生长情况，表3解释，以1/2MS(大量元素用量减半)+NAA和1/2MS(大量元素用量减半)+IBA培育基对月季根的诱导效果均较为理想，而且浓度都在0.3-0.75mg/l范围内较为适合，但以NAA为较佳。其中NAA生根率较高达92%，移栽成活率高达89%，IBA的生根率也高达90%，移栽成活率达87%。 将小苗接种到上述培育基中10天后其基部伤口基本愈合，18天则长出许多小白根，培育30天发根率均达90%以上，且长有3条以上，长度达2.0cm以上白根的占80%以上。2．4炼苗移栽 在生根培育基中，无菌苗生长迅速，植株逐渐结实起来，其根系生长尤为迅速，在多数根系长达1.0cm，其根尖仍保持兴旺生长状态，此时即可进入太过种植(炼苗)阶段，移栽前先将瓶苗移出恒温培育室，在常温下置于较强散射光中炼苗7天，打开瓶盖后继续炼苗2~7天，然后小心取出放入清水中洗濯清洁，注重少伤根，移栽到以草碳土+珍珠岩(体积比1∶1)的基质中，浇透水并覆盖塑料膜，保持相对湿度85~90%，温度15~25℃，10天后逐渐揭膜炼苗，15~20天可将塑料膜所有揭除，并浇施营养液弥补营养，其成活率一般可达70%以上，待小苗长至10~15cm左右时，就可移植到田间定植。