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秋海棠组培快繁技术

导读

秋海棠一、植物竹节秋海棠(B.President-carnot)二、材料类别叶片、叶柄、茎段三、培养条件以MS为基本培养基。诱导愈伤组织培养基:(1)MS+BA3——5mg/L(单位下同)+NAA0.1——0.5。丛生芽增殖培养基。(2)M……

秋海棠

一、植物

竹节秋海棠(B.President-carnot)

二、材料种别

叶片、叶柄、茎段

三、培育条件

以MS为基本培育基。诱导愈伤组织培育基:(1)MS+BA3——5mg/L(单位下同)+NAA0.1——0.5。丛生芽增殖培育基。(2)MS+BA1.0+NAA0.1。(3)MS十BA0.5十NAA0.1。(4)壮苗培育基:1/2MS(液体)。(5)诱导生根培育基:1/2MS+NAA0.2。上述培育基均加3.0%蔗糖、0.8%琼脂,pH值5.8。培育温度(24±2)℃,光照不宜过强,有80Olx左右即可,光照10h/d。

四、生长与分化情况

(一)无菌材料得到将竹节秋海棠已平展之幼嫩叶片、叶柄、茎段先用适量洗衣粉对水洗涤,然后用自来水频频冲洗,于无菌条件下用75%酒精药棉擦拭清洁,放于饱和漂白粉溶液10分钟,后置于0.1%升汞溶液中消毒2分钟,用无菌水冲洗5——6次,消毒滤纸吸收干外面水分,叶片切成0.5cm见方小块,叶柄、茎段则切成约长1cm左右长条,均接种于培育基(1)上。

(二)丛芽的诱导与增殖接种、培育1周后,叶、叶柄、茎段周围开始膨大、增厚,质地变硬,逐渐形式黄绿色愈伤组织,3周后逐渐分化出小芽点,芽点继续生长,约5周左右形成显著的丛生芽。将丛生芽切成小块,接种于(2)和(3)培育基上举行增殖,小芽丛上不停分化出许多幼芽。叶、叶柄、茎段在两个培育基上增殖速度基真相同,约4周左右继代1次,增殖系数可达6——9。

(三)壮苗在举行大量增殖阶段后,我们截至固体培育而改为液培,将分化芽转接到1/2MS,3周后,可发现生长结实、个别粗壮的无根苗。这为以后生根、移苗出瓶,提高适应外界环境,加强抗病能力,提供了良好条件,移栽更易成活。

(四)根的诱导将高约3cm、生长健硕的无根壮苗,接种到培育基(5)上。2周后,苗基部长出辐射状白色小根,每株生根5—7条,3周后,根伸长至1.0—1.5cm,生根率达100%。

(五)试管苗的移栽将培育有试管苗的三角瓶盖打开,在实验室透风处炼苗3d,取出小苗,洗去根部残留培育基,栽植前根部在0.2%Na2SO4溶液中滞留片晌。移栽到用高压灭菌消毒过的蛭石+细沙+园土(1:1:1)的夹杂基质中,地上部喷施0.1%多菌灵溶液,用薄膜覆盖,每天喷水2次,1周后揭膜,成活率在95%以上。

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