美国金钟连翘组培快繁技术的研究

美国金钟连翘为木犀科连翘属的半常绿灌木，是连翘和金钟花的杂交种，性状集中金钟和连翘优点，早春满枝金黄，艳丽可爱，生长期枝条拱形睁开，尤以晚秋冬初翠绿欲滴，形成一道亮丽的风景线，近年来在园林中广为应用。下面就由来给你介绍美国金钟连翘组培快繁技术的研究。

美国金钟连翘多以扦插法繁殖，存在繁殖率低、苗木质量差、不整齐等晦气因素，极大地限制了这一优良品种在园林中的应用规模。利用组培快繁技术对美国金钟连翘举行快速繁殖，可在短期内生产出大量整齐、均匀的结实植株，并有利于种质资本的保留、优良品种的应用与推广，以及为基因克隆和生产转基因植株做准备质料[2]。

1质料与方式
1.1质料

供试质料为从南京中山植物园引种的美国金钟连翘。

1.2方式

1.2.1外植体的处理。

选择生长结实、清洁而且无病虫害、昔时生长的植株。剪取带腋芽的茎段切生长1.5cm的切段，在流水下冲洗2~5h，用饱和漂白粉液浸泡25min，在超净工作台上用0.1%的HgCl2溶液浸泡5min，无菌水冲洗5次后接种。

1.2.2增殖培育。

在MS+NAA0.1mg/L的培育基中，划分加入0mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.5mg/L的6-BA；在MS+6-BA1.0mg/L的培育基中，加入0.1mg/L的NAA、IBA和IAA，观测试管苗的生长和增殖情况。培育基含蔗糖30 g/L、琼脂7g/L。每种培育基用于统计的样品为随机抽取15瓶，每瓶中只接1个外植体，增殖系数界说为每个外植体所发生新芽的个数。

1.2.3生根培育。

在1/2MS的培育基中，加入不同浓度的IBA、NAA和IAA，观测试管苗的生根情况。培育基含蔗糖15g/L、琼脂7g/L。每种培育基用于统计的样品为随机抽取20瓶，每瓶中只接1个丛生芽，统计生根率。

1.2.4培育条件。

培育温度25~28℃，光照11~12h/d，光强1000~1500Lx，培育基pH值5.9。

2效果与讨论
2.1增殖培育

将带节茎切段接种到不同浓度的6-BA的MS+NAA0.1mg/L 培育基上，培育至第九天时在多数培育基上外植体节上有侧芽萌动，培育至第十七天时在一些培育基上茎两头切口处形成愈伤组织，培育至第三十六天时大多数培育基上有芽天生，第四十五天时统计发生的新芽数目，计算增殖系数，效果如图1所示。由图1可知，随着6-BA浓度的增大，试管苗的增殖系数显示为先上升后下降的趋势。当6-BA浓度为1.0mg/L时，试管苗的增殖系数为6.3，显著高于其他各浓度处理。
在MS+6-BA1.0mg/L的培育基中，划分加入0.1mg/L的NAA、IBA和IAA，统计试管苗的增殖系数，其效果如图2所示。图2注释，相同浓度的NAA、IBA和IAA对试管苗的增殖系数的影响不尽相同。其中NAA为0.1mg/L时试管苗增殖系数较大，显著高于IBA和IAA。综合图1和图2可知，美国金钟连翘试管苗增殖的较适培育基应为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。

2.2生根培育

将培育在MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L的增殖苗切成单芽植株，接种到划分添加0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L、2.5mg/L的IBA、NAA和IAA的1/2MS培育基中，观测试管苗的生根情况，统计生根率，效果如图3所示。由图3可知，当激素浓度相同时，添加IAA显著有利于促进试管苗的生根；当IAA浓度为1.5mg/L，试管苗的生根系数较大，达98.7%。因此，较适合美国金钟连翘试管苗生根培育的培育基为1/2MS+IAA1.5mg/L。
2.3试管苗的移栽

试管苗在瓶内生根后，在自然光照和温度20~25℃的条件下炼苗20d左右，当苗高7~10cm、有4~5条白色长根时，从瓶内取出洗净培育基，然后移栽到蛭石中，每天浇Horland营养液，并加塑料袋保湿，10d后成活率达84.3%。定植于腐殖土中并移入温室种植，最终成活率可达91.2%。