高尔夫球场草坪线虫病害实验室诊断与乐成防治

1 线虫的特征和重要种类

线虫是一种低等动物，属线形动物门，线虫纲。在自然界中分布很广，在水中、土壤和寄主中生活。有的在植物中寄生，也有的在动物中寄生。在植物上寄生的线虫多为专性寄生。一般体形为圆筒状，两头尖。大多数为牝牡同形。体形细小，长为0.030～0.16厘米。少数为牝牡异形，雌虫为梨形或肾形、球形或长囊形。在线虫的口腔内有口针或轴针，状似注射器针头，用以取食。在取食时，将口针刺入寄主细胞，并将唾液输入寄主细胞，吮吸寄主汁液。被线虫取食后的植物组织会发生一些生理变化，也就是在一定程度上发生伤口，这种伤口会引起植物病原菌的寄生和其它腐生菌的侵入，引起发病。

根据线虫的取食方式，可分为两大类：一种是外寄生线虫，这类线虫只有取食时才将口针穿刺到寄主植物的体内，虫体外露，平时生活于土壤中。由于取食与栖息不在一处，它们经常往返于土壤与植物根系之间，而且取食的植株不牢靠，一条线虫可以危害多株植物。在它们转移危害时，线虫往往成为其它病害的传播介体。 另一种是内寄生线虫，虫在取食时必须进入植物根内部或其他组织内部。

1.1 内寄生线虫

1.2 粒线虫属(Anguina)：大多寄生在禾本科植物的地上部，在茎叶上形成虫瘿，或

者损坏子房后形成虫瘿。

茎线虫属(Ditylenchus)：危害多栽植物的地下茎、球茎、块茎、鳞茎，有的危害地上部叶、花、芽或嫩茎组织，受害后显示为坏死或诱发畸形病变。

滑刃线虫属(Aphelenchoides)：有各种危害状，剑叶干尖，干枯卷缩，叶片组织坏死。

异皮线虫属(Heterodera)：又称胞囊线虫属，危害植物的地下部，尤其是根部，病根发育不良，地上部显示植株矮小、枯黄，似缺肥症状。

根结线虫属(Meloidogyne)：寄主范围极广，危害多栽植物的根部，受害植物的根酿成结状或瘤状肿大，削开结状组织皮层，仔细观测，可见肿根内有梨形的雌虫。受害植物地上部显示营养不良、枯黄、矮小。

1.3 外寄生线虫

剑线虫属(Xiphinema)：齿针很长，基都球大，为瘤状，导环位置低。

长针线虫属(Longidorus)：齿针很长，基部球不大，导环位置高。

毛刺线虫属(Trichodorus)：瘤针弯曲，基部渐粗，形似毛刺。

2.线虫的发生与环境

不同种类的线虫对环境条件要求不同，适于线虫发育和孵化的温度为20－30℃，温度

太高(40－50℃)对线虫生长晦气，甚至可以致死。线虫在土壤或植物组织中产卵。孵化后形成幼虫，幼虫侵入寄主后为害。幼虫一般为害四次，即酿成虫。交配后雄虫死亡，雌虫产卵，线虫完成其生活史的时间不同，一般为一个月左右，一年可繁殖十几代。

不同种类的线虫对土壤水分的要求不同。大多数线虫在较干旱的条件下有利于生长繁殖；而有些线虫则在淹水条件下有利于生长繁殖。线虫一般在沙壤土中发生严重，但有些线虫则在粘壤土中也发生严重。

3 线虫病害重要症状

线虫对作物的致病作用，除用口针刺伤寄主，发生伤口外，另有线虫在植物组织内穿行所造成的机械损伤。另外线虫在用口针取食时排泄唾液，由于唾液中含有各种毒素和酶，使植株发生各种病变。线虫病害重要症状(1)植株生长缓慢、色泽失常、叶片萎蔫与营养不良症状相似，引起草坪希罕，整体发黄；(2)局部畸形，植株或叶片干枯、扭曲、畸形、组织腐烂、软化及坏死。茎叶上发生褐色黑点、籽粒酿成虫瘿膨大、须根丛生、根部腐烂

4 高尔夫草坪线虫病害的星散与诊断方式

植物寄生线虫重要存在于土壤和植物组织中，星散线虫的方式有许多，要根据线虫的种类、研究目的等来选择适宜的方式。植物寄生线虫的个体很小，除少少数可从植物组织中直接挑出以外，绝大多数需借助特定的对象和方式才能完成。线虫的星散重要是利用它的趋水性、大小、比重以及与其他杂质的不同，采取过筛、离心、漂浮等措施，将线虫从植物组织、土壤中星散出来。

4.1 质料、试剂与仪器

(1)实验质料 感染线虫病的植物病根、病土等。

(2)仪器或实验用具 剖解镜、漏斗星散装置、漂浮星散装置、浅盘星散装置、纱布或铜纱、记数皿或平皿、小烧杯、小玻管、旋盖玻璃瓶、40目和325目网筛、线虫滤纸、餐巾纸、挑针、竹针、毛针、毛笔等。

(3)试剂 线虫牢靠液。

4.2 星散方式

(1)直接观测星散

对于个体较大的线虫如根结线虫、孢囊线虫、粒线虫的雌虫等，可直接用挑针从植物组织中挑取，也可在剖解镜或扩大镜观测下直接挑取，对于虫体稍小的线虫如茎线虫、粒线虫的雄虫和幼虫等，需在剖解镜下，用竹针或毛针直接挑取。

取感染线虫的植物病根质料(如果干质料需用水浸泡住宿)，剥开皮层，观测内里是否有针头大小、乳白色发亮的颗粒状物。用挑针挑取，置凹玻片上水滴中，在剖解镜或显微镜下观测是否为线虫雌虫。

(2)漏斗星散法

该方式操作较简单，是现在从植物质料中星散线虫较好的方式。其装置是将直径10-15cm 的玻璃漏斗架在铁架上，下面接一段约10 cm 的橡皮管，橡皮管上装一个弹簧夹。植物质料切碎用双层纱布包好，浸在盛满清水的漏斗中，静止24h，由于趋水性和自身的重量，线虫就脱离植物组织或土壤，沉降到漏斗底部的橡皮管中。

(3)培育星散法

对于用漏斗星散法不易星散到的线虫，如根结线虫和孢囊线虫的雄性成虫等，可采取培育星散法。从土壤中得到病根后要马上冲洗和培育，由于24h后，有50%的线虫会从根里爬出，冲洗时便被冲掉了。

(4)浅盘星散法

该方式原理与漏斗星散法一样，但星散效果更好，而且泥沙等杂物较少。用两个不锈钢浅盘套放在一起，上面一个是筛盘，它的底部是筛网，网目大小为10目/英寸，下面一个是稍大的盛水盘。也可在培育皿上放置一个稍小的做成浅盘状的金属网，网与培育皿底部保持一定距离。

(5)漂浮器星散法

对于没有活动能力的孢囊线虫的孢囊可采取漂浮器星散法(Fenwick-Oostenbrink改良漂浮法)，该法需要特制的星散装置。星散时先将漂浮筒内盛满清水，将100g 风干的土样放在上筛中，用强水流冲洗土样，使其所有洗到漂浮筒内，并从环颈水槽流到承接的细筛(100目)中，再用细水流冲洗一会，使漂浮物所有流入细筛。将细筛中的孢囊等漂浮物用水洗入烧杯或三角瓶中，再倒入铺有滤纸的漏斗中，用毛笔网络并观测滤纸上的孢囊。漂浮星散的土样必须要风干，否则孢囊不能在水中漂浮，需用比重小于1的溶剂。

5 线虫危害的纪录标准和分级

高尔夫球场草坪常见线虫危害的分级和纪录标准

6 线虫病害的综合防治

6.1合理施肥

注重合理施肥与适时浇水，每年的3-6月和9-11月，根据往年的线虫发生的情况，要勤施磷肥和钾肥，轻施氮肥，深浇水，可以削减线虫危害的发生。

6.2 药物防治

选用线虫净、荧光杆菌(Bacillus fluorescens)、巴斯德氏芽菌属、二硫代氨基甲酸盐(酯)类、土壤熏蒸剂等举行防治。线虫净属环保型线虫防治专用产品，喷施1000倍稀释药液量300-500ml/m2，严重时喷施稀释药液500-1000ml/m2，10天内连用2-3次，能显著控制线虫的危害。